Ruiz de Arechavaleta Mariana, Rosso Adriana, Fraga Isabel. Centro de investigación y desarrollo sobre contaminantes orgánicos especiales (CISCOE) Instituto Nacional de Tecnología Industrial. Parque Tecnológico Miguelete. Tel/Fax: 0054-11-4754-4066. E-mail: ciscoe@inti.gov.ar
INTRODUCCION
El óxido de etileno es un gas a temperatura ambiente que se emplea como esterilizante en dispositivos biomédicos que no soportan, sin sufrir daño, las temperaturas elevadas impuestas por la esterilización por calor.
La determinación del óxido de etileno residual en el material esterilizado tiene interés toxicológico dado que es un compuesto perjudicial para la salud que es absorbido por los materiales poliméricos y por lo tanto puede llegar al paciente. Es por eso que las farmacopeas y/o las regulaciones fijan tolerancias para los residuos de óxido de etileno en el material esterilizado.
La Norma ISO 10993-7:1995 "Evaluación biológica de dispositivos médicos" en su parte 7 "Residuos de esterilización por óxido de etileno" establece metodologías alternativas.
Para la cuantificación del óxido de etileno (OE) se establecieron las condiciones óptimas en cuanto a variables cromatográficas y el empleo de un estándar interno, óxido de propileno (OP). La muestra a ser analizada se pesa en un vial y el gas esterilizante se extrae con 5 ml de isopropanol durante 3 horas con agitación térmica.
Posteriormentemente, se analiza el espacio de cabeza de las soluciones por cromatografía gaseosa con detector de ionización de llama. La cuantificación se realiza mediante una curva de calibración considerando la relación de áreas entre el OE y el OP.
Equipos: Se utilizó un cromatógrafo Hewlett-Packard modelo 5890 Serie II, con detector de ionización de llama; un muestreador de Head-Space Hewlett-Packard modelo 7694. Reactivos: Oxido de etileno, pureza >99.5%; Oxido de propileno, pureza 99.5%; Isopropanol, p.a. Materiales: Viales tipo penicilina de 10 ml, septas y precintos de aluminio; jeringas Hamylton de 10 y 250 ul.
1 Linealidad y Rango: Capacidad (dentro de un rango dado) de producir resultados que son directamente proporcionales a la concentración (cantidad) de analito presente en la muestra. La linealidad se expresa normalmente en términos de la varianza de los residuos (desvíos de los puntos medidos respecto de la pendiente), de la curva de regresión calculada de acuerdo con una relación matemática establecida a partir de los resultados obtenidos por análisis de soluciones con distintas concentraciones de analito. El rango de un método analítico es el intervalo entre la concentración (cantidad) superior e inferior de analito en la muestra (incluyendo estas concentraciones) para el cual se ha demostrado que el procedimiento analítico tiene un adecuado grado de precisión, exactitud y linealidad.
Análisis:
Se construyó la curva de calibración, preparada a partir de una solución de óxido de etileno de concentración 0.565 mg/ml. Los datos obtenidos a partir de la misma se muestran en la siguiente tabla:
ul solució n OE 0 1 1 5 5 10 10
50 50 100 100 200 200
ug de OE 0
0.565 0.565 2.826 2.826 5.653 5.653
28.26 28.26 56.53 56.53 113.05 113.05
Area OE 190 630 642 2582 2775 5244 5451
27547 28003 54417 55457 106669 110413
Area OP 56882 54659 57324 55968 57596 56571 58549
56570 59170 56197 58400 55021 58163
Resum en
Coeficiente de correlación múltiple Coeficiente de determinación R^2 R^2 ajustado Error típico Observaciones
Estadísticas de la regresión
Rel ación de ár eas (OE/OP) 0.003340248 0.011526007 0.011199498 0.046133505 0.048180429 0.092697672 0.093101505 0.486954216 0.473263478 0.968325711 0.949606164 1.938696134 1.898337431
0.999904688 0.999809385 0.999792057 0.010104842
13
Intercepción Variable X 1
Coeficientes 1.46845E-05 0.016968344
Error típico 0.003593065 7.06419E-05
Estadístico t 0.004086904 240.2021447
Probabilidad 0.996812309 8.1711E-22
Inferior 95% -0.007893603 0.016812862
Superior 95% 0.007922972 0.017123826
0,04 0,02
0 -0,02 0 -0,04
Gráfico de los residuales
20
40
60
80
100
120
Variable X 1
Curva de regresión ajustada
3
2
Y
1
Pr onós tico
0
0
50
100
150
ug de OE
ug de óxido de etileno agreg. 5.653 5.653 5.653 5.653 5.653 5.653
Area de óxido de etileno 5049 5249 5104 5356 5156 5224
Area de óxido de propileno 56350 57894 54856 59771 56239 58214
Rel aci ón de ár eas (OE/OP) 0.089600710 0.090665699 0.093043605 0.089608673 0.091680151 0.089737864 Prom edi o Desv. Est. CV (%)
ug de OE calculados 5.2796 5.3424 5.4825 5.2801 5.4021 5.2877 5.3457
0.08239254 1.54127666
1° nivel 3° nivel
Val or teór ico agregado (mg) 0.565 5.653
Promedio de mediciones (mg) 0.707792153 5.345724907
Desv. Est. 0.024554298 0.082407096
t hallado 14.2 9.1
2
Muestra con agregado
Area de óxido de etileno Area de óxido d e propileno
14325
55963
14641
56064
14609
55126
14992
56584
Rel.de ár eas (OE/OP) Masa muestr a (g)
0.255972696
0.4969
0.261147974
0.5240
0.265011066
0.5194
0.264951223
0.5234
ug de OE calculados 15.08 44426 39 15.38 94386 66 15.61 71032 99 15.61 35765 79
Muestra sin agregado
11468 11533 11151 11682
53784 56247 52497 54416
0.213223263 0.205042047 0.212412138 0.214679506
0.5140 0.4987 0.5088 0.4975
12.56 50787 68 12.08 29329 12 12.51 72764 85 12.65 08999 07
ug de óxido de etileno agreg. 0.565 0.565 0.565 0.565 0.565 0.565
Area de óxido de etileno 690 732 702 661 671 690
Area de óxido de propileno 57394 58760 56772 58427 55164 58343
Rel aci ón de ár eas (OE/OP) 0.012022163 0.012457454 0.012365250 0.011313263 0.012163730 0.011826612 Prom edi o Desv. Est. CV (%)
ug de OE calculados 0.7076 0.7333 0.7279 0.6659 0.7160 0.6961 0.7078
0.024552148 3.468797483
Promedio (%) Desv. Est. C.V.
101.525 5.779489597 5.692676284
Mu est ra 1 Mu est ra 2
Curv a de calib ració n (mg/g) 1.1 ± 0.1 3.2 ± 0.2
Método de Kolb (mg/g) 0.6 ± 0.1 2.1 ± 0.2
Ver+/-
