Valproato de Magnesio: validación de una nueva metodología para su determinación
en formas farmacéuticas
Eduardo E. López§, Leonardo Nardini§, Pablo D. Rouge§, José Gallo#
§: CEQUIPE, #: MEDIPHARMA S.A. Av. 143 N°2025, La Plata (1900)
H3C
Valproato de magnesio :
O O-
Mg
INTRODUCCION:
El ácido valproico es un agente antiepiléptico empleado en el tratamiento de varias formas de epilepsia. Su acción terapéutica no está totalmente dilucidada pero se sabe que involucra una modificación del comportamiento del ácido g-aminobutírico a nivel cerebral. Puede utilizarse tanto en su forma ácida, como la amida, el éster, la sal sódica y en algunos casos la sal de magnesio. Para este último caso, por no hallarse descripta en las distintas farmacopeas la determinación de valproato de magnesio en comprimidos, se desarrolló un método ad hoc. El mismo consiste en aplicar la Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC) en las siguientes condiciones:
Columna : C-18 standard Fase móvil: buffer fosfato / metanol a pH = 3 Detector : UV-VISIBLE ( 210 nm )
La cuantificación se realizó contra materia prima cuyo título se halló mediante titulación con ácido perclórico en ácido acético glacial.
Debido a ser éste un método novedoso se hace imperiosa su validación, para lo cual se estudiaron los siguientes parámetros:
Rango de comportamiento lineal del método Precisión Exactitud (recuperación) Fortaleza (ruggedness) Robustez (robustness)
ß 210 nm
H3C
2
Espectro UV Valproato de magnesio
50,8 mg/ml 254,2 mg/ml 508,4 mg/ml 762,6 mg/ml 1016,9 mg/ml
1271,1 mg/ml 1525,3 mg/ml 2033,7 mg/ml
Figura 1 : Espectro UV-visible de valproato de magnesio.
RESULTADOS DE LA VALIDACION:
- Linealidad
- Precisión - Exactitud - Robustez - Fortaleza
: R2 = 0,9998 (Ver cromatogramas y curva de linealidad) : RSD% < 2% : 97 % : RSD% < 2% : RSD% < 2%
En el ensayo de precisión se realizaron tres inyecciones consecutivas de cinco preparados distintos, todos provenientes del mismo pool de muestra.
En cuanto a la exactitud del método esta fue evaluada realizando agregados precisamente medidos del analito a soluciones de la muestra.
La robustez se evaluó provocando cambios intencionales en algunas de las variables que podrían influenciar al sistema cromatografico empleado para la cuantificación del principio activo. Alguno de estos cambios se ven ilustrados en la tabla presentada en la figura 4.
CONCLUSION:
Como conclusión podemos decir que los valores obtenidos para dichos parámetros están dentro de los límites aceptados por las distintas farmacopeas, por lo cual resulta una metodología analítica adecuada para la determinación de valproato de magnesio en la forma farmacéutica de comprimidos.
Figura 2: Cromatogramas tipo de valproato de magnesio obtenidos en el ensayo de linealidad.
Area
1600000 1400000 1200000 1000000
800000 600000 400000 200000
0 0.00000
LINEALIDAD VALPROATO
y = 673776x R2 = 0.9998
0.50000
1.00000
1.50000
conc (mg/ml)
Figura 3: Curva de linealidad.
2.00000
2.50000
Modificación
Columna N°41 Temp. = 25°C
pH = 2,5 Columna N°41 Temp. = 25°C
pH = 3,5 Columna N°41 Temp. = 20°C
pH = 3.0 Columna N°41 Temp. = 30°C
pH = 3.0 Columna N°52 Temp. = 25°C
pH = 3.0
Peso (mg)
Factor de dilución
51.9
0.02
Areas 676414
Area/masa
Promedio y RSD%
13033
51.9
0.02
669751
12905
12903
51.9
0.02
665729
12827
0.61
51.9
0.02
668960
12889
51.9
0.02
667411
12860
Figura 4 : Tabla de valores obtenidos en el ensayo de robustez
Ver+/-
