Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
INTI – Seminario Internacional
“Validación de Métodos, Control de Calidad y Estimación de la Incertidumbre de Medición Aplicable al Análisis Multirresiduos de Pesticidas” Buenos Aires (Argentina), 16-17 Junio 2009
Directrices de Validación y Control de Calidad para el Análisis Multirresiduos de
Plaguicidas de la DG SANCO de la UE
Antonio Valverde García
Grupo Residuos de Plaguicidas Universidad de Almería
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Directrices de Validación y Control de Calidad para el Análisis Multirresiduos de Plaguicidas de la DG
SANCO de la UE
- Introducción
- Características Generales de los Métodos Analíticos de Control de Residuos de Plaguicidas
- Documento SANCO/2007/3131: Validación y Control de Calidad
- Ejercicios de Intercomparación sobre Residuos de Plaguicidas de la Comisión Europea (D.G. SANCO)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
PLAGUICIDAS
NECESARIOS
Más y Mejores Alimentos
TÓXICOS
Biocidas
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Plaguicidas / Fitosanitarios / PPPs NECESARIOS
• Cosechas libres de plagas con unas pérdidas mínimas (evitan pérdidas del orden del 30-40%).
• Asegurar y mejorar el suministro de alimentos a la población mundial (> 6.000 millones con un crecimiento de 94 millones/año).
• Disminuir el nivel de toxinas naturales producidas por hongos y bacterias en las cosechas (asegurar la higiene de los alimentos).
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Plaguicidas / Fitosanitarios / PPPs RIESGOS
• Pueden ser perjudiciales para salud del aplicador (riesgos laborales).
• Pueden ser perjudiciales para el medioambiente (riesgos mediambientales).
• Presencia (inevitable) de RESIDUOS EN LOS ALIMENTOS que llegan al consumidor (riesgos relacionados con la seguridad de los alimentos).
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Evolución Típica de los Residuos de un Plaguicida en un Alimento que ha sido Tratado Fitosanitariamente
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
PLAGUICIDAS
Fijación y Control de LMRs
NECESARIOS
Más y Mejores Alimentos
RESIDUOS
¿Perjudiciales para la salud?
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
EVALUACIÓN Y CONTROL DE LOS RESIDUOS DE PLAGUICIDAS EN ALIMENTOS
RESIDUOS DE PLAGUICIDAS
Evaluación Toxicologica
Evaluación Agronómica
IDA – DRF Aguda
LMR
Estimación de ingesta
CONTROL
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
PROGRAMAS OFICIALES DE CONTROL DE LOS LMRs
- Programas Regionales / Nacionales / UE (D.G. SANCO)
- Programas No Dirigidos - "Surveillance“ / Dirigidos - "Compliance" CONTROLES “IN HOUSE” - Controles realizados por los productores, previos a la comercialización - Deberían ser Controles Dirigidos
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Características Generales de los Métodos Analíticos de Control de
Residuos de Plaguicidas
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Análisis Multirresiduos (analito / matriz)
Preparación Muestra Extracción Clean-up
GC
LC
NPD - FPD - PFPD - ECD
MS
UV/DAD Fluorescencia
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Métodos Multirresiduos (Futuro: QuEChERS)
Pequeñas cantidades (15 g) Acetonitrilo
Fases Sólidas
Preparación Muesrta Extracción Clean-up
GC
LC
NPD - FPD - PFPD - ECD
MS
UV/DAD Fluorescence
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
MS Data Review All Plots - 03/08/2006 10:26
File: c:\\varianws\\data\\20060711\\c1.xms
Sample: C1
Operator: LPC
Scan Range: 1 - 2286 Time Range: 0.04 - 13.00 min.
Date: 11/07/2006 14:15
kCounts
Ions: 129.0 1:3 c1.xms 1200 CENTROID FILTERED
60 Calabacín Muestra #1
QuEChERS – LC/MS-MS
Spectrum 1A BP 248 (143027=100%) c1.xms
100%
248
143027
50
Area: 253380 75%
40
S/N: 47
50%
30
129
62750
20
155/129 = 20%
25%
10
155
12308
0
0%
2.5
5.0
7.5
10.0
m1in2u.5tes
125
150
175
200
225
25m0/z
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
MS Data Review All Plots - 03/08/2006 10:29
File: c:\\varianws\\data\\20060711\\cal zh 5 ppb.xms
Sample: CAL ZH 5 ppb
Operator: LPC
Scan Range: 1 - 2286 Time Range: 0.04 - 13.00 min.
Date: 11/07/2006 12:50
kCounts
Ions: 129.0 1:3 cal zh 5 ppb.xms 1200 CENTROID FILTERED
80
70 Forchlorfenuron Patrón en extracto Forchlorfenuron
de calabacín 60 5 ppb
Area: 330001
S/N: 61
QuEChERS – LC/MS-MS
Spectrum 1A BP 248 (147617=100%) cal zh 5 ppb.xms
100%
Cl
O
C
N
NN
HH
75%
248
147617
50
129
80665 40
50%
155/129 = 22%
30
20 25%
155
10
18124
0
0%
2.5
5.0
7.5
10.0
m1in2u.5tes
125
150
175
200
225
25m0/z
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
MS Data Review All Plots - 03/08/2006 10:26
File: c:\\varianws\\data\\20060711\\c1.xms
Sample: C1
Operator: LPC
Scan Range: 1 - 2286 Time Range: 0.04 - 13.00 min.
Date: 11/07/2006 14:15
kCounts
Ions: 129.0 1:3 c1.xms 1200 CENTROID FILTERED
60 Calabacín Muestra #1
50
Resultado: 4 ppb Forchlorfenuron
40
Forchlorfenuron Area: 253380
S/N: 47
QuEChERS – LC/MS-MS
Spectrum 1A BP 248 (143027=100%) c1.xms 100%
Cl
N
75%
O C NN HH
248
143027
50%
30
129
62750
20
155/129 = 20%
25%
10
155
12308
0
0%
2.5
5.0
7.5
10.0
m1in2u.5tes
125
150
175
200
225
25m0/z
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Análisis de Residuos de Plaguicidas DIFÍCILES
RESULTADOS CON ELEVADA INCERTIDUMBRE
¾ Gran influencia de la destreza del analista ¾ y del estado de mantenimiento de los equipos ¾ Respuesta de los equipos variable con el tiempo ¾ ”Efecto Matriz” imprevisible ¾ Interferencias imprevisibles (matriz, reactivos, etc.) ¾ Inexistencia de “Materiales de Referencia”
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Análisis de Residuos de Plaguicidas DIFÍCILES
RESULTADOS CON ELEVADA INCERTIDUMBRE
Imprescindible la utilización de MÉTODOS VALIDADOS y la aplicación de CONTROLES DE CALIDAD
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
VALIDACION DEL METODO ANALITICO
OBJETIVO
Demostrar, de forma experimental y previamente a su utilización, que el método es adecuado para el propósito que se ha fijado (alcance) y que produce resultados de calidad verificable.
RESULTADO
Información suficiente para probar que, para el alcance fijado (ANALITOS, CONCENTRACIONES, MATRICES), el método tiene adecuadas:
ESPECIFICIDAD VERACIDAD (Trueness)
SENSIBILIDAD PRECISIÓN (Precision)
EXACTITUD (Accuracy) = VERACIDAD y PRECISIÓN
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Análisis de Residuos de Plaguicidas Validación
NECESARIA
¾ Defender los resultados del análisis
(ante consumidores, clientes, importadores, jueces, ...)
¾ Acreditación
PROBLEMÁTICA ACTUAL
Limitado acuerdo internacional sobre los requisitos mínimos que deben exigirse, sobre todo para métodos MULTIRRESIDUOS.
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Análisis de Residuos de Plaguicidas Control de Calidad
• Actualmente, es admitido por todo el mundo que las características de este tipo de métodos de análisis pueden variar apreciablemente de un día a otro, e incluso de una secuencia de análisis a otra.
• Por tanto, es completamente necesario realizar controles de calidad (internos) rutinarios, además de los controles de calidad externos, para verificar y complementar la validación del método de forma continua.
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Análisis de Residuos de Plaguicidas Control de Calidad
• Incluso en laboratorios acreditados, los controles de calidad aplicados en cada laboratorio de análisis de residuos de plaguicidas pueden ser muy diferentes, pudiendo ser por tanto muy diferentes la “calidad” de sus resultados.
• Impulso de estrategias para llegar a armonizar dichos criterios, sobre todo en los laboratorios oficiales de control:
Method Validation and Quality Control Procedures for Pesticide Residues Analysis in Food and Feed
SANCO/2007/3131 (31/10/2007)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Garantía de la Calidad de los Análisis
¾ No confundir con las actividades rutinarias de
“Control de Calidad” de los ensayos.
¾ El “Control de Calidad Rutinario” forma parte de los ensayos y se realiza para demostrar la validez de los resultados de cada ensayo.
¾ Las actividades de “Garantía de la Calidad” forman parte del plan global de evaluación de la calidad del laboratorio.
¾ En general, las actividades de “Garantía de la Calidad” consisten en la realización periódica de “pruebas de actitud”
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Garantía de la Calidad Actividades Típicas
¾ “Ejercicios de Intercomparación” ¾ Análisis de “muestras ciegas” ¾ Intercambio de muestras con otros labs ¾ Análisis de “Materiales de Referencia”
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Implicación de la Comisión Europea (D.G. SANCO) en la Calidad de los Análisis Oficiales
de Residuos de Plaguicidas
http:/www.europa.eu.int/comm/food http:/www.crl-pesticides.eu
Method Validation and Quality Control Procedures for Pesticide Residues Analysis in Food and Feed
SANCO/2007/3131 (31/10/2007)
EU Proficiency Tests for Pesticide Residues
in Fruits and Vegetables (EU-PTs 1 to 10)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Revisiones del Documento SANCO - AQC
1. Doc. 7826/VI/97 (1st EU AQC,1997, Portugal) 2. Doc. SANCO/3103/2000 (2nd EU AQC, 1999, Grecia) 3. Doc. SANCO/10476/2003 (3rd EU AQC, 2003, UK) 4. Doc. SANCO/10232/2006 (4th EU AQC, 2005, Suecia) 5. Doc. SANCO/2007/3131 (5th EU AQC, 2007, España)
6. Nueva revisión durante 2009 (6th EU AQC, 10/2009, Dinamarca)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Documento SANCO/2007/3131
Objetivos Fundamentales
¾ Establecer un sistema armonizado (cost-effective) de aseguramiento de la calidad en la UE
¾ Asegurar la calidad y la comparabilidad de los resultados analíticos ¾ Asegurar una aceptable exactitud de los resultados ¾ Asegurar que no se informen falsos positivos o falsos negativos ¾ Servir de apoyo para la acreditación (cumplir con la ISO/IEC 17025)
¡En Laboratorios Oficiales de la UE!
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
METHOD VALIDATION AND QUALITY CONTROL PROCEDURES FOR
PESTICIDE RESIDUES ANALYSIS IN FOOD AND FEED
Document N° SANCO/2007/3131 31/October/2007
¾ Introduction (1-4) ¾ Accreditation (5) ¾ Sampling, transport, processing and storage of samples (6-14) ¾ Pesticide standards, calibration solutions, etc. (15-23) ¾ Extraction and concentration (24-27) ¾ Contamination and interference (28-34) ¾ Analytical calibration, representative analytes, matrix effects
and chromatographic integration (35-53)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
¾ Analytical method validation and performance criteria (54-59) ¾ Routine recovery determination (60-65) ¾ Proficiency testing and analysis of reference materials (66-67) ¾ Confirmation of results (68-79) ¾Reporting of results (80-93)
¾ Annex 1 (Selection of representative matrices) ¾ Appendix 1 (Glossary)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Claves para la interpretación del documento
SANCO/2007/3131
may = opción should = recomendación must = obligación
(Appendix 1 – Glossary)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Validación
- Puede realizarse sobre Matrices Representativas - Como mínimo, una matriz por categoría de producto - Validación complementaria durante los análisis
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Validación
Categorias de Producto para la selección de Matrices Representativas (Annex 1)
HORTALIZAS, FRUTAS Y CEREALES
- Alto contenido en agua - Alto contenido en aceite - Alto contenido en proteínas ó almidón - Alto contenido ácido - Productos “difíciles ó singulares”
(Clasificación basada en los criterios de la OECD)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Validación
Categorias de Productos para la selección de Matrices Representativas (Annex 1)
PRODUCTOS DE ORIGEN ANIMAL
- Carne - Leche y productos lácteos - Huevos - Miel
(Clasificación basada en los criterios de la OECD)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131: Annex 1
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Criterios mínimos de Validación
2 Niveles de Fortification por cada Matriz Representativa - Límite de Informe (n = 5) - Otro nivel más alto / MRL (n = 5)
Para cada Nivel de Fortificación/Matriz Representativa: - Recuperación Media* = 70-120 % - Coeficiente de Variación ≤ 20 %
* En casos justificados podrían ser aceptables diferentes valores
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Criterios de Validación en SANCO/10232/2006
Table 2. Criterios para métodos cuantitativos
Concentration range (mg/kg)
Repeatability
RSDA %
RSDL %
0.001 - 0.01 30
32
>0.01 – 0.1 20
22
>0.1 – 1
15
18
>1
10
14
Mean recovery range (%)
70 - 110 70 – 110 70 – 110 70 – 110
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Actividades Clave de Control de Calidad
SANCO/2007/3131
Calibración Analítica Ensayos de Recuperación Rutinarios
Confirmación de Resultados
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Calibración
- Patrones en Matriz (uso alternativo de analitos “protectores”) - Calibración en cada tanda de análisis - Patrones antes y después de las muestras (< 20% - 30%) - Residuos < LCL* deben ser informados como < LCL - La Señal/Ruido del LCL debe ser mayor o igual a 6:1
*LCL = Nivel más bajo de calibración
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Calibración
Interpolación entre 2 Niveles de Calibración - Nivel alto ≤ 4 veces el nivel bajo - FR alto/FR bajo < 120% (110% si se supera un LMR)
Calibración con 3 o más niveles (Función de Calibración) - Cada punto no debe desviarse en más del ±20% (10%)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Calibración
1 nivel de Calibración - Puede producir resultados más exactos - La señal en la muestra debe estar entre el ±50% (20%)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Tabla 1. Frecuencias mínimas de calibración
Se establece un número mínimo de Analitos Representativos de calibración por cada sistema de detección
Analitos Representativos ≥ 15 + 25% plaguicidas analizados
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Table 2. Frecuencias de las recuperaciones de rutina y verificación
Se establece un número mínimo de Analitos para la recuperación rutinaria: 10% Analitos Representativos (mínimo 5) en cada sistema de detección
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Ejemplo sobre el número mínimo de Analitos Representativos de Calibración y Analitos de recuperación de rutina
Ensayo con un Alcance de 150 plaguicidas (50 por LC + 100 por GC)
Analitos Representativos en LC = 15 + 12.5 → 27
Analitos Representativos en GC = 15 + 25 → 40
Analitos Recuperación Rutina en LC = 2.7 → 5
Analitos Recuperación Rurina en GC = 4 → 5
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Criterio de Aceptación para las recuperaciones de rutina
64. Los límites aceptables para un resultado de recuperación individual deben estar normalmente en el intervalo de la Recuperación Media +/- 2x %RSD y pueden ser ajustados utilizando datos de repetibilidad (validación) y reproducibilidad intra-laboratorio (recuperaciones de rutina).
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Ejemplo de una secuencia cromatográfica
(QuEChERS AOAC Collaborative Study)
1) 0 - STD (matrix blank) 2) 250 ng/g STD 3) 10 ng/g STD 4) Test Sample #1 5) Test Sample #2 6) Test Sample #3 7) Test Sample #4 8) 5 ng/g STD
1
16
6 11
5
10
15
9) 50 ng/g STD 10) Test Sample #5 11) Test Sample #6 12) Test Sample #7 13) QC Spike (200 ng/g) 14) 100 ng/g STD 15) 1000 ng/g STD 16) Reagent Blank
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Imidacloprid
STANDARDS SAMPLES QC SPIKE
Added
Calculated
Conc.
Conc.
Imidacloprid Calibration
Sample
(ng/g) Signal (ng/g) % "Reference"
0-Std 5 ng/g Std 10 ng/g Std
0
0
-1,3
5
508
5,5 111%
10
794
9,4 94%
70000
60000 y = 63,108x + 849,37
50000
R2 = 0,9996
Signal
50 ng/g Std
50
3802
50,1 100%
40000
100 ng/g Std
100
7896
112 112%
30000
250 ng/g Std 1000 ng/g Std Orange Test #1 Orange Test #2
250 1000
93 989
16000 64050
5340 54830
240 1001 71,2
855
96% 100% 77% 86%
20000 10000
0 0
200 400 600 800 1000 1200
Orange Test #3
0
0
0,0 100%
Added Concentration (ng/g)
Orange Test #4
10
863
10,3 103%
Orange Test #5
93
6238
85,4 92%
Orange Test #6
10
849
10,1 101% Hi Range:
Slope =
63 per ng/g
Orange Test #7
989 58360
911 92%
Y-Intercept =
849
QC Spk
200 13780
205 102% Overall % "Refer." =
93%
9% RSD
INTERLABORATORY MEAN CONCENTRATION (No. Labs = 11)
QuEChERS Collaborative Results (University of Almeria / Coexphal)
ORANGE/Imidacloprid (LC/MS-MS) (Unknown Spike Levels)
Signal
Imidacloprid Calibration
4000 y = 73,967x + 98,712
3000
R2 = 0,9995
2000
1000
0
0
10
20
30
40
50
60
Added Concentration (ng/g)
Low Range:
Slope = 73,96712 per ng/g
Y-Intercept =
99
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Confirmación de los resultados Separación Cromatográfica
72. ... El tiempo de retención relativo del analito en la muestra debería coincidir con el correspondiente en la disolución de calibración con una tolerancia de ±0.5% para GC y ±2.5% para LC.
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Confirmación de los resultados
Confirmación MS: # 73 - 79
Mínimo de Iones / Transiciones - Full Scan (MS): 4 iones (intensitad > 10% pico base) - SIM: 2 iones (m/z > 200) ó 3 iones (m/z > 100) - MS/MS: 2 transiciones
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Confirmación de los resultados Confirmación MS
Tabla 3. Tolerancias máximas permitidas para las intensidades relativas de los iones de la muestra respecto al patrón
Intensidad relativa (% del pico base)
EI-GC-MS (relativa)
CI-GC-MS, GC-MSn,
LC-MS, LC-MSn (relativa)
> 50 %
± 10 %
± 20 %
> 20 % to 50 %
± 15 %
± 25 %
> 10 % to 20 %
± 20 %
± 30 %
≤ 10%
± 50 %
± 50 %
¡Utilización de patrones en matriz de similar concentración!
SemMinSarDioaINtaTIR(Beuveienows AAilrlePs,loJtusni-o02300/098) /–2V0a0li6da1c1ió:n52y Control de Calidad – Antonio Valverde
File: c:\\varianws\\data\\20060719\\blanco tomate.xms
Sample: BLANCO TOMATE Scan Range: 1 - 2286 Time Range: 0.05 - 13.01 min.
Operator: LPC Date: 19/07/2006 11:00
kCounts
Ions: 129.0 1:3 blanco tomate.xms 1200 C ENTROID FILTERED
Spectrum 1A BP 248 (89119=100%) blanco tomate.xms
100%
25
Tomato Blank
75% 20
1A
15 50%
10
25% 5
248 89119
0
0%
2.5
5. 0
7.5
10.0
m1in2u.5tes
125
150
175
200
225
25m0/z
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
MS Data Review All Plots - 03/08/2006 11:54
File: c:\\varianws\\data\\20060719\\cal mtalfa.xms
Sample: CAL MTALFA
Operator: LPC
Scan Range: 1 - 2286 Time Range: 0.04 - 13.00 min.
Date: 19/07/2006 11:21
kCounts
Ions: 129.0 1:3 cal mtalfa.xms 1200 CENTROID FILTERED
Spectrum 1A BP 248 (62279=100%) cal mtalfa.xms
100%
25
Standard in tomato
20
blank extract
75%
1 ppb
15
Forchlorfenuron
Area 50349 50%
10
S/N (RMS): 169
S: 10835
N: 64
25%
129
5
11010
248 62279
0
0%
2.5
5.0
7.5
10.0
m1in2u.5tes
125
150
175
200
225
25m0/z
SemMinSariDo aINtaTIR(Beuveineows AAirlel sP, lJoutnsio-20030/90)8–/V2a0l0id6ac1ió1n:5y7Control de Calidad – Antonio Valverde
File: c:\\varianws\\data\\20060719\\cal mta1.xms
Sample: CAL MTA1
Operator: LPC
Scan Range: 1 - 2286 Time Range: 0.05 - 13.01 min.
Date: 19/07/2006 13:51
kCounts
Ions: 129.0 1:3 cal mta1.xms 1200 CENTROID FILTERED
Spectrum 1A BP 248 (184928=100%) cal mta1.xms
100% 100
Standard in tomato blank extract
10 ppb
75% 75
Forchlorfenuron
129
Area: 452994 S/N: 158
107506
50% 50
248
184928
25
25%
155
23612
0
0%
2.5
5.0
7.5
10.0
m1in2u.5tes
125
150
175
200
225
25m0/z
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
MS Data Review All Plots - 03/08/2006 12:06
File: c:\\varianws\\data\\20060719\\cal tc.xms
Sample: CAL TC
Operator: LPC
Scan Range: 1 - 2286 Time Range: 0.05 - 13.01 min.
Date: 19/07/2006 17:46
kCounts
Ions: 129.0 1:3 cal tc.xms 1200 CENTROID FILTERED
Spectrum 1A BP 248 (1,004e+6=100%) cal tc.xms
Standard in tomato
blank extract
750 100 ppb
100% 129
951087
75%
248 1,004e+6
500
Forchlorfenuron Area: 3,697e+6 S/N: 7977
250
50%
25%
155 183191
0
0%
2.5
5.0
7.5
10.0
m1in2u.5tes
125
150
175
200
225
25m0/z
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
MS Data Review All Plots - 03/08/2006 12:19
File: c:\\varianws\\data\\20060719\\t3.xms Sample: T3 Scan Range: 1 - 2286 Time Range: 0.05 - 13.00 min.
kCounts
Operator: LPC Date: 19/07/2006 14:55
Ions: 129.0 1:3 t3.xms 1200 C ENTROID FILTERED
Spectrum 1A BP 248 (23811=100%) t3.xms
100%
248 23811
25
Tomato sample #3
Negative
75% 20
1A 15
50%
10
25% 5
0
0%
2.5
5.0
7. 5
10.0
12.5
125
150
175
200
225
250
minutes
m/z
SeminaMrioSINDTIa(tBauReneovsiAeiwresA, lJluPniloot2s00-90) 3–/V0a8l/id2a0c0ió6n 1y 2C:o2n8trol de Calidad – Antonio Valverde
File: c:\\varianws\\data\\20060719\\t6.xms
Sample: T6
Operator: LPC
Scan Range: 1 - 2286 Time Range: 0.06 - 13.01 min.
Date: 19/07/2006 15:59
kCounts
Ions: 129.0 1:3 t6.xms 1200 CENTROID FILTERED
Spectrum 1A BP 248 (38564=100%) t6.xms
100%
20
Tomato sample #6
Positive = 1 ppb
75% 15
248 38564
Forchlorfenuron
Area: 47902 S/N: 144
50% 10
129 16675
25% 5
155 2476
0
0%
2.5
5.0
7.5
10.0
m1in2u.5tes
125
150
175
200
225
25m0/z
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Informe de los resultados
Interpretación de los resultados
90. Considerando los resultados obtenidos hasta la fecha en los “EU proficiency tests”, un valor por defecto del 50% para la incertidumbre expandida (correspondiente a un nivel de confianza del 95%), en general cubre la variabilidad inter-laboratorio entre los laboratorios europeos y es recomendado para ser utilizado por las autoridades a la hora de decidir si un producto es rechazado por superar un LMR.
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
European Union
EU-PTs
EUPT-1 (1996): Peppers EUPT-2 (1997): Apples EUPT-3 (1999): Cucumbers
Proficiency
Tests
Swedish NFA
Oranges Lettuces Tomatoes Grapes StOrvaerwegirrniees Carrot
EUPT Number
EUPT EUPT EUPT EUPT EUPT EUPT EUPT
4
5
6
7
8
9
10
No. of Labs reporting results
111 123 126 125 128 132 129
No. of pesticides in the EUPT sample
14
15
13
16
16
19
18
Organizer (year)
Swedish NFA (2002)
Swedish NFA (2003)
Univ. of Almería (2004)
Univ. of Almería (2005)
CRLFV Univ. of Almería
(2006)
CRLFV Univ. of Almería
(2007)
CRLFV Univ. of Almería
(2008)
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
EU “Proficiency Test” EUPT-07 (2005)
% 45
RSD (CV) Interlaboratorio
40
Incertidumbre: 40% - 60% ( 2 x RSD)
35 (k = 2; 95%)
30
25
20
15
10
5
0 Qn (%)
Uvas / 125 Labs
Acetamiprid Carbaryl Cyprodinil Diazinon Dimethoate Fenhexamid Fludioxonil Imidacloprid Iprodione Kresoxim-methyl Methomyl Monocrotophos Procymidone Pyrimethanil Tetraconazole Thiabendazole
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Document N° SANCO/2007/3131
Informe de los resultados
Interpretación de los resultados
93. Si es requerido, el resultado debe ser informado junto con la incertidumbre expandida (U), de la siguiente forma: Resultado = x ± U (unidades), siendo x el valor medido. In case of official food control by regulatory authorities, compliance with the MRL has to be checked by assuming the lower limit of the uncertainty interval (x – U) to be the highest confirmed analyte concentration in the sample…
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
¿Violativo ó no violativo? Resultado = 1.65 ± 0,82 mg/kg (k = 2; 95%)
1,65 mg/kg
§§ LMR = 1,0 mg/kg
Seminario INTI (Buenos Aires, Junio 2009) – Validación y Control de Calidad – Antonio Valverde
Documento SANCO/2007/3131
Resultados sin Incertidumbre
2.4
Resultados con Incertidumbre (50%) (k = 2; 95%)
mg kg-1
2.2
2.01 mg/kg
1.8
1.65 mg/kg 1.4
No violativo
Violativo
1.0
LMR = 1.00 mg/kg
Con una incertidumbre expandida del 50%, un resultado (X) será violativo cuando X > 2 LMR
Ver+/-
